72 发置酵置技置术
重、同时,发酵罐的利用率也有所降低。灭菌时应避免过长时间加热。因为加热时间过长、不仅会破坏营养物质、面取强
汽不足、温度不够高的情况,这时可以适当延长灭菌时间。 引起培养液中某些有害物质的生成、从而影响培养效果。在实际生产中、可能
5、分批灭菌的注意事项①培养基配置应注意计量准确、所配制的培养基体积应扣除种子液的体款和天三号冷凝水的预留体积,②在培养基开始实消前,须对发酵罐进行空消)③加热和保温过程中,各路蒸汽进口要通畅、防止短路避流;罐内液体量动要动并校正H、DO等传感电谈。以使罐内物料达到均一的天菌温度:排气量不宜过大、以节约蒸汽用量:应防止突然开大关小进汽、排气阀门、避免泡沫大量产生、造成灭菌不底、便营养成分遭别破坏:污水还应注意,凡在培养基液面下的各种进口管道均应通人蒸汽、而在培养基以上的美余量排放蒸汽,保证不留“死角”、天菌彻底。保温结束后的冷却阶段,应先关闭各排汽阀门、再关闭各进汽阀门、待自然净里罐内压力有所降低后,再在夹套或蛇管中通人冷却水、当培养基温度降至20~80℃时,东可打开搅拌器、否则易损坏搅拌器,另外、在罐内压力低于空气分过滤器压力时、必须通入无菌空气保压,以避免罐压迅速下降产生负压而吸人外界空气发生二次污染或引起发解温面
器内。 坏,在引人无菌空气之前、罐内压力必须低于过滤器压力、否则培养基将倒流进入过滤
(三)连续灭菌
分批灭菌的显著缺点是升降温时间长,对培养基成分破坏大、培养基体队越大该问题塞突出,营养成分破坏也越严重。而以“高温、快速”为特点的连续灭菌、培养基在发时间内被加热到灭菌温度(一般高于分灭菌温度,130~160℃),短时间保温(一般为s~8mm)后,被快速冷却,再进入早已灭菌完毕的发酵罐。
1.连续灭菌的定义菌的方法,也称为连消
连续灭菌是指将配制好的培养基在向发酵罐输送的同时进行加热、保温和冷面进入
2.连续灭菌的特点
连续灭菌的优点有:☑培养基升温、降温较、灭菌时间、可减少培养基中营养成全却,热利用率高;酵设备利用率高。的损失操作条件恒定,灭菌质量稳定便于管道化和自动化控制避免反复加热和关
高:操作烦顼:菌机会多:适合大量固体物料的灭菌。 连续灭菌的缺点有:①设备投人多、要求高,需另外设置加热、冷却装置汽要
3.连续灭菌流程
连续灭菌的流程根据设备和工艺条件的不同可分为以下三种形式。
(1)连消塔加热的连续灭菌流程该流程如图4-2所示,培养基经配料后、经测泵缸象出,用连消泵送入加热器或连消塔底部,输入速度控制在低于0.1m/min、料液被加热全身菌温度132℃,在塔内停留时间为20~30s,然后由顶部流出、进人维持罐、保温维持,影响培养基灭菌的质量。变,送去发酵罐,该流程要求培养基输人的压力与蒸汽总压力相近,否则培养基的流途个25min后由上部侧面流出,维持罐内最后的培养液由底部排尽,经喷淋冷却器冷糊到发配美
项目四 发酵工业的无菌操作 73
灭童打的填养
图4-2 连消塔加热连续灭菌流程
1一调浆罐:2-连消家:コ一连消塔,4一维持罐:s一喷淋冷却器
(2)喷射加热器加热的连续灭菌流程该流程如图4-3所示,由喷射加热、管道维持、人喷射加热器,并与喷入的高温蒸汽直接接触混合,真空冷却组成。灭菌时,培养基将以一定流速喷射进使培养基温度短时间内急速上升到预定灭菌温度,在原料介质蒸汽 T-140℃
该温度下于维持管中维持一段时间灭菌,保温时间由 →真空
维持管道的长度来保证。灭菌后培养基通过膨胀阀单 保温段
向进人真空冷却器急速冷却至发酵温度。该流程由于
培养基总的受热时间短,因而不致引起培养基的严重 2
破坏;并能保证培养基在喷射加热器和维持管中的先
进先出,避免过热或灭菌不彻底现象。但真空冷却系 灭菌介质
统要求严格密封,以免重新污染。 图4-3 喷射加热器加热连续灭菌流程
(3)薄板换热器加热的连续灭菌流程该流程如 1一膨胀阀:2一真空冷却器
图4-4所示。灭菌时可在薄板换热器中培养基可同时
完成预热、加热和冷却过程。加热段可使预热后的培养基温度升高,经维持管保温一段时间,然后在冷却段进行冷却,并对生培养基预热。该流程在对灭菌过的培养基冷却时可进行生培养基的预热,节约了蒸汽及冷却水用量;虽然加热和冷却所需时间比使用喷射式连续灭菌稍长,但灭菌周期比间歇灭菌小得多。但由于薄板换热器结构的限制,只适合于含少量固形悬浮物的培养基的灭菌,若固形悬浮物含量较高,可改用螺旋板式换热器。
出料35℃ 55℃ 120℃ 蒸汽147℃
水20℃ 31℃ 进料35℃ 100℃ 120℃ 维持管120℃
图4-4 薄板换热器加热连续灭菌流程
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