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项目四 发酵工业的无言操作 65

“死角”模容易造成灭菌不帮底，因此，挡板的安装不能采用全焊接，采用三到四点的点焊接方法连接井加固，蛇形管托板和支架都会堆积菌丝体并形成集化物，每生产完一批都要认真冲洗检查

⑤发罐上其他可能构成的“死角”有些工厂为了防止碳钢发酵罐中铁离子对代谢的影响，在碳钢发酵罐内衬一层很薄的不锈钢村里，安装村里后，衬层与罐整之间形成了微小的中间星，极容易成为杂菌藏匿的安全点，必须淘汰衬里的发酵罐，发酵罐顶封头上或排气管上安装了压力表，如果发酵过程中泡沫过多，物料黏结，灭菌焦化会导致压力表小孔堵塞失灵、应经常进行压力表小孔的清理和疏通。

(5)设备渗漏引起的染菌及防治发酵设备、、阀门的长期使用，由于腐蚀、摩擦和动等原因，往往会造成渗漏，例如:设备的表面或焊缝处如有砂眼,由于腐蚀逐渐加深、最终导致穿孔:冷却管受搅拌器作用。长期磨损，焊缝处受冷热和振动产生裂缝而

渗漏。 为了避免设备、管道、阀门渗漏，应选用优质的材料，并经常进行检查。冷却蛇管的微

小渗漏不易被发现，可以压人碱性水;在罐内可疑地方，用浸湿酚酞指示剂的白布擦抹,如有渗漏时白布显红色。

(6)操作问题在发酵过程中如操作不当也会引起染菌，如移种时或发酵过程罐内压力跌零，使外界空气进人而染菌:泡沫顶盖而造成污染;压缩空气压力突然下降，使发酵液倒流人空气过滤器而造成污染等。防止操作失误引起染菌，要加强对技术工人的技术培训和责任心教育，提高工人素质，强化管理措施。

(7)噬菌体污染及其防治引起发酵生产噬菌体污染的原因，大都是由于在生产过程中，人们不加注意而把大量活菌体随意排放，这些活菌体栖息于周围环境，同少量与其有关的其他溶源性菌株接触，经过变异和杂交，最终产生使生产菌株溶菌的烈性噬菌体，并在环境中逐渐增殖，随空气流动，污染种子和发酵罐，被噬菌体污染的发酵罐又大量排气，造成污染的恶性循环。

防治噬菌体染菌的方法具体归纳为以下几点。

①定期检查噬菌体并采取有效措施消灭噬菌体当发酵生产中已经发现了噬菌体的危害后，应立即在车间的各个工段及发酵罐的空气过滤系统、发酵液和排气口、污水排放处以及车间周围的环境中进行取样检测,从中找出噬菌体较集中的地方继而采取相应的措施。如对种子室和摇床间可采用甲醛熏蒸及紫外线处理的方法消灭噬菌体和杂菌。对常用器皿及发酵罐体表面，可采用新洁而灭及石炭酸溶液喷雾或擦洗。发酵系统则可采取改进空气过滤装置和蒸汽灭菌的方法。

②检查生产系统,消除各种不安全因素在发酵生产中，当连续发生噬菌体污染后，往往在空气过滤装置及发酵罐底部、内壁、夹层以及管道和阀门接口等处容易存在蒸汽不能直接进入灭菌的死角，必须及早查出隐患，定期更换空气过滤器中的过滤材料并改进工艺和设备，杜绝发酵液中的活菌和可能存在的噬菌体向周围的环境排放，彻底消除各种不安全因素，保证生产的正常进行。

③选育抗噬菌体菌株和轮换使用生产菌株选育抗噬菌体菌株是一种有效的手段，所获得的抗性菌株既要有较全面的抗性，并能保持原有的生产能力。对有的菌种在选育中很难做到既有抗性又能保持原有的生产能力，所以在可能的情况下，针对噬菌体对侵染寄主具有正常进行。

专一性的特点，采用轮换使用生产菌株的方法，也可防止噬菌体的蔓延和危害，使生产得以

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井改造往复式空气压机、①取高取气、合理设计空气品理流程，根据主际情况增加必要的除油除水设备，样合活的过读介热、过挂器介质多采用高管照建芯、过建面积大，操作简便，

要与口下几个方面有关, 和总空气过燃器糕水、开助止京气系统气、液钢离。 31培养某天满不期指导指染苗及勘治培养易和设备灭菌不面底的原因和防治措施工 二加工菌步气茶统的管理、定期对总空气过能器进行检查和消毒、防止空气总管路

①原料性款薄的培养基比勒稠的培养基更容易御鹿灭菌，液体培养居比含有固人巨粉的培养基更容易灭菌。在发酵原料中，经常会使用到淀粉质原料，极易成块，使团块中心部份“来车、包理有活菌、澳汽不易进入将其杀天,在发解过程中团块散开，导致染菌,所以，含有钢粒物的培养基田可翻会天苗不相您，因此，除粉质培养基天菌以采用实罐灭为好，在升温时先模拌混合均匀、并加一定量。淀粉酶边加热边液化，有大颗粒的原料的

粉碎后过她方能进行地养基的配制及灭菌。 丈睡灭窗时未充分排除罐内空气实罐灭菌时，罐内空气未完全排除，造成"假

，使罐顶空间局那温度达不到灭菌要求，导致灭菌不彻底而污染，为此，在实罐灭菌升报时，皮打开排气阀门及有关连接管的边阀、压力表接管边阀等，使蒸汽通过,达到彻底

天菌。

①塔养基连续灭菌时未达到灭菌温度培养基连续灭菌时，蒸汽压力波动大，培养基未达到天菌温度，导致天菌不彻底而污染。培养基连续灭菌应严格控制灭菌温度，最好采用

自动控制装置。 天菌结束后罐压骤变造成染菌在灭菌操作结束后，若用冷却水冷却过快会造成量

内压，外界空气进入导致染菌。因此，在灭菌结束后发酵罐冷却前应先通入无菌空气维持罐内正压，再进行冷却，以避免染菌的产生。

(4)设备，管道存在“死角”造成的染菌及其防治由于作、备结构、安装或人为造成的屏障等原因，引起蒸汽不能有效到达或不能充分到达预定灭菌部位，从而不能达到省底灭菌的要求，这些不能底灭菌的部位称为“死角”，罐内罐外设备上的“死角”有以下儿方面:

罐内空气分布管所构成的“死角”空气分布管类型主要有放射式空气分布管、环管式空气分布管、牛角环管式空气分布管和直接开口式空气分布管。前两种空气分布管容易塞，不便于清洗，是造成灭菌不彻底的主要原因，而后两种空气分布管不会发生焦化堵塞没有“死角",

罐内管路所构成的“死角”发酵罐罐内管路如空气分布管、物料压出管、取样管接种管等一般均从罐顶进人，然后紧靠罐壁向下延伸至罐底。这种安装会形成罐内管路与壁之间的缝隙，高温灭菌后的焦化物堆积于此构成“死角”。合理的安装方法是:空气分

装在下部,

管和物料压出管从罐外延伸，在发酵罐罐底封头上方开口进罐，在罐内对接;取样管直接受搅拌密封泄露形成的“死角”发酵罐与外界唯一有接触性连接的就是搅拌轴处的封，由于搅拌轴的连续运转，同时受到罐压及温度变化的影响，轴封密封不严也容易污染确保轴封密封不漏，除了要注意轴封的保养及定期更换外，更需要重视搅拌轴系统的安装包括:罐体的找正，机架安装的偏差度，减速机和电机的安装找正，机封底盘安装的

搅拌轴安装后下轴头摆差度和底轴承及底支架安装的偏差度。

D罐内挡板和支架形成的“死角”发酵罐内的挡板、蛇形管的支架和托板，所形成